Lors de ce TP, nous avons étudié la croissance bactérienne d'Escherichia coli. E. coli est une bactérie résidente du tube digestif des organismes à sang chaud et elle est couramment étudiée en laboratoire. L'objectif de ce TP est de déterminer le temps de génération G ainsi que sa croissance spécifique ?.
Sommaire
Suivi de la croissance bactérienne de E. coli par mesure de la densité optique
Suivi de la croissance par dénombrement sur boîtes de Pétri
Étalonnage du spectrophotomètre
Frottis des produits laitiers
Suivi de la croissance bactérienne de E. coli par mesure de la densité optique
Suivi de la croissance par dénombrement sur boîtes de Pétri
Étalonnage du spectrophotomètre
Frottis des produits laitiers
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Extraits
[...] = 0,0222 min-1 Calculons le temps de génération G : G = Ln2/? = 31 minutes Selon nos résultats, E. coli met 31 minutes pour réaliser son temps de génération (c'est -à -dire sa reproduction par scissiparité comme énoncé dans l'introduction). II) Suivi de la croissance par dénombrement sur boîtes de Pétri : Le but de cette expérience est de déterminer le nombre de bactéries E. coli, avant et après les deux heures de mise en culture à 37 degrés. Ainsi, nous pourrons déterminer le nombre de bactéries que E. [...]
[...] coli par dénombrement sur boîte de Pétri. Ce dénombrement nous montre que la reproduction de cette bactérie est extrêmement rapide, elle peut produire des milliards de nouveaux individus en l'espace de 2 heures. Ainsi, le temps de génération de E. coli est extrêmement bas, contrairement à d'autres bactéries comme L.acidophilus = 100 minutes) ou M.tuberculosis = 3 jours). Notre bactérie E. coli se reproduit très vite, ce qui fait d'elle le sujet d'étude de choix en laboratoire. Bibliographie : http://umr5558-shiny.univ-lyon1.fr/web/modélisation-de-la-croissance-des-micro-organismes.html#:~:text=Mesure%20de%20la%20 croissance%20bactérienne&text=soit%20par%20une%20mesure% 20de,avec%20le%20nombre%20de%20bactéries. [...]
[...] Ainsi : Nombre de bactéries / mL tube 4 (premier tube sans trouble) = 10-6 Nb tube 5 = 106 x 10-1 = 105 Nb tube 6 = 105 x 10-1 = 104 Nb tube 7 = 104 x 10-1 = 103 = 1000 Nb tube 8 = 103 x 10-1= 102 = 100 Nb tube 9 = 102 x 10-1 = 101 = 10 Nous avons ensemencé les boîtes de Pétri de sorte que la dilution contienne entre 30 et 300 bactéries/mL (approximation). Ainsi, nous avons ensemencé les dilutions des tubes et 9 (valeurs les plus proches du domaine 30-300). Puis, nous avons laissé les boîtes de Pétri à l'étuve à 37 degrés pendant 24 heures : Dilution pour T0 Résultats pour T0 Tube 7 : On dénombre 50 colonies de E. [...]
[...] Étant donné que le tube 8 du T0 semble erroné, nous ne pouvons pas non plus prendre le tube 8 du T2H (par souci de cohérence) pour trouver le nombre initial de bactéries. Nous ne pouvons pas non plus prendre les tubes car le tube 7 du T2H dépasse les 300 colonies. S'il y a plus de 300 colonies, un risque d'inhibition existe par manque d'espace sur la boîte de Pétri, le résultat est donc faussé. Ainsi, nous prenons les tubes 9 (dilution de 10-8) : On dénombre 31 colonies pour la T0 et 66 colonies pour la T2H. [...]
[...] Ainsi la limite de linéarité s'arrête aux DO correspondantes à ces tubes : Le domaine de linéarité du spectrophotomètre va donc de 0,127 (dilution 2/10 ; tube à 0,379 (dilution 8/10 ; tube 3). Nous constatons alors que les valeurs de DO de la partie I ne sont pas toutes comprises dans ce domaine de linéarité, ainsi, les DO données par le spectrophotomètre à T0, T20, T100 et T120 peuvent être incorrectes. Il est donc possible que nos valeurs de ? et G (obtenue grâce aux DO aux différents temps) soient peu précises voire incorrectes. IV) Frottis des produits laitiers : Nous avons observé l'aspect de bactéries contenues dans un yaourt nature. [...]
